莫能霉素 Monensin(蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑)
細(xì)胞因子(Cytokines)表達(dá)水平高低直接反映細(xì)胞在特異性刺激劑(物)下的應(yīng)答活動,免疫學(xué)研究通常使用適當(dāng)?shù)拇碳﹣砑せ罴?xì)胞應(yīng)答,并通過某些藥物如莫能霉素(monensin)或布雷非德菌素A(Brefeldin A,BFA)作用以阻斷胞內(nèi)高爾基體介導(dǎo)的蛋白轉(zhuǎn)運,促使細(xì)胞因子累積,提高細(xì)胞因子的胞內(nèi)信號,從而能借助流式分選技術(shù)(FACS)檢測細(xì)胞因子的表達(dá)水平。細(xì)胞因子表達(dá)具有自身的特征性。
常見的蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑:
1、Monensin 莫能霉素,CAS:22373-78-0
簡單描述:天然離子載體(ionophore),選擇性結(jié)合單價陽離子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+,并將這些陽離子轉(zhuǎn)運到細(xì)胞膜內(nèi)。可破壞高爾基體,抑制細(xì)胞內(nèi)的蛋白轉(zhuǎn)運,常用作蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑,用于抑制細(xì)胞因子等分泌型蛋白的分泌,使其保留在細(xì)胞內(nèi)。
2、Brefeldin A(BFA,布雷非德菌素A),CAS:20350-15-6
簡單描述:一種常用的蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑,特異性地可逆地阻斷蛋白質(zhì)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)轉(zhuǎn)運到高爾基體(Golgi)。經(jīng)BFA處理,高爾基體很快被破壞并融合到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,該過程呈現(xiàn)能量、溫度和微管依賴性。BFA是一種真菌代謝物,最初曾用作抗病毒試劑,現(xiàn)主要用于研究蛋白轉(zhuǎn)運。BFA也常被用于抑制細(xì)胞因子等蛋白的分泌,并用于增強分泌蛋白的免疫染色檢測。BFA可激活神經(jīng)鞘磷脂循環(huán)(sphingomyelin cycle),還可誘導(dǎo)一些腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。
一些應(yīng)用實例:
細(xì)胞因子 | 克隆號 | 靶向細(xì)胞 | 刺激物 | 刺激時間 | 蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑 | 表面標(biāo)志蛋白 |
IL-2 | JES6-5H4 | Splenocytes | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
IL-3 | MP2-8F8 | Purified CD4+ T cells stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 + IL-4 for 3-4 days | PMA (20 ng/ml) Plus ionomycin (1μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD4 |
GM-CSF | MP1-22E9 | Splenocytes stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4 day | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
IFN-γ | XMG1.2 | Splenocytes | PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) | 4-6 h | monensin or brefeldin A | CD3 |
訂購信息:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 |
100mg | ||
1ml | ||
5mg | ||
25mg | ||
200μl | ||
1ml |
相關(guān)產(chǎn)品:
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5mg | ||
25mg | ||
100μl | ||
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