Trypsin (from Bovine), TPCK Treated 牛來源胰蛋白酶

產(chǎn)品簡介：

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，來源于胰腺的一種絲氨酸蛋白酶，由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽，底物特異性是帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側(cè)鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端，當(dāng)兩者之一緊隨為脯氨酸的情況除外。另外，當(dāng)切割位點任一邊緊鄰酸性殘基，胰酶水解速率也會減緩。 胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以無活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通過切割其末端六肽而得到活化，產(chǎn)生天然單鏈形式的β-胰酶（β-Trypsi n），隨后進(jìn)行有限的自發(fā)裂解產(chǎn)生具水解活性的α-Trypsin（由二硫鍵共價連接的二條肽鏈組成）。胰酶水解活性可被多種化合物所抑制，有1）來源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制劑；2）銀離子；3）有機(jī)磷化合物，如氟磷酸異丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制劑，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；本品是來源于牛胰腺的胰蛋白酶，經(jīng)N-(對甲苯磺?；?-L-苯丙氨酰甲基氯酮（TPCK）預(yù)處理以抑制任何殘留的糜蛋白酶活性，具更高的胰蛋白酶活性。本品以凍干粉形式提供，比活力≥10,000 BAEE units/mg。

產(chǎn)品特性: 

1）EC NO：3.4.21.4 

2）CAS NO：9002-07-7 

3）同義名：Trypsin, from bovine pancreas, TPCK Treated; 胰酶，來源于牛胰腺，TPCK處理；

4）分子量：23.8 kDa 

5）外觀：類白色或微黃色結(jié)晶粉末 

6）溶解性：溶于1mM HCl（1mg/ml） 

7）比活力（胰蛋白酶）：≥10,000 BAEE units/mg 

8）比活力（糜蛋白酶）：≤0.1 BTEE units/mg

9）級別：測序級胰酶

使用方法：

 1.產(chǎn)品溶解 

   儲存液制備：溶于1mM HCl（pH 3）配制母液，充分溶解，-20℃分裝凍存，至少穩(wěn)定保存~1年。加入Ca2+（20mM）能延緩胰蛋白酶的自溶和維持胰蛋白酶在溶液內(nèi)的穩(wěn)定性。 

   穩(wěn)定性：胰蛋白酶在2.0M尿素，2.0M鹽酸胍或0.1%（w/v）SDS維持絕大多數(shù)活性。在高pH（＞11）下不可逆變性，或添加三氯乙酸 （TCA，終濃度10%）沉淀樣品，或加入高濃度尿素（＞6.5M）變性。

   為了去除所有胰蛋 白酶活性，在1%（w/v）SDS下于100℃至少加熱5min。

 2.產(chǎn)品用法 

   使用時，將儲存液稀釋在50mM NH4HCO3 pH 7.8或pH7~8的合適緩沖液內(nèi)（根據(jù)具體用途來選擇稀釋緩沖液）。

注意事項：

1）胰蛋白凍干粉產(chǎn)品常遇到的活性定義及其轉(zhuǎn)換：

     1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6的條件下，以BAEE為底物，3.2 ml的反應(yīng)體系中，A253吸光值每分鐘會發(fā)生0.001的變化即為一個酶活單位。

     1TAME Unit：在25℃，pH 8.2，0.001M Ca2+條件下，每分鐘水解1μmolp-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

     1 USP Unit：在指定條件下，每分鐘引起吸光值發(fā)生0.003的變化的樣品活性。 

     1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit 

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存與運(yùn)輸方法:

保存：-20℃密封干燥保存，至少2年有效。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。