5-FAM SE (5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester)

5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester,5-FAM SE）是5/6-FAM SE（FITC-NHS）的單一純化異構(gòu)體，是5-FAM的胺反應(yīng)性琥珀酰亞胺酯。是最受歡迎的綠色熒光染料之一，用于多肽、蛋白和核苷酸的標(biāo)記，也能用于制備各種小熒光分子。

產(chǎn)品特性：

1） CAS NO.：92557-80-7

2） 同義名：5-FAM, SE;5-FAM,NHS ester;5-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester;5-Carboxyfluorescein NHS ester;5-Carboxyfluorescein, succinimidyl ester; 5-羧基熒光素N -羥基琥珀酰亞胺酯；5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯；

3） 分子式：C₂₅H₁₅NO₉

4） 分子量：473.39

5） 熒光：λex 492 nm; λem 517 nm in DMF

6） 外觀：粉末

7） 溶解性：溶于DMSO、DMF

8） 純度：≥95%

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，2年有效。 

注意事項(xiàng)：

1.       5-FAM SE對(duì)濕度敏感。為了避免產(chǎn)品受潮，務(wù)必在開(kāi)蓋前將低溫保存的產(chǎn)品從冰箱取出，平衡至室溫至少30min再使用。

2.      熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

3.      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

SE化合物生物標(biāo)記的幾個(gè)考慮因素：

1） 溶劑

大多數(shù)情況下，SE化合物（反應(yīng)性染料）都是疏水性分子，需用無(wú)水DMF或DMSO作為溶劑。比如：5-FAM SE（Mw：473.39）需先溶于高質(zhì)量無(wú)水DMSO配制成≥1mg/ml的母液，之后加入反應(yīng)緩沖液中進(jìn)行標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。強(qiáng)烈推薦新鮮配制母液和工作液，如果非要保存母液的話，請(qǐng)務(wù)必根據(jù)單次用量分裝，≤-20℃避光密封干燥保存，盡量在1個(gè)月內(nèi)用完。

2） 反應(yīng)pH

SE與胺的標(biāo)記反應(yīng)具非常強(qiáng)的pH依賴性。胺反應(yīng)化合物與非質(zhì)子化的脂肪胺反應(yīng)，包括：蛋白的末端胺，賴氨酸的ε-氨基。氨?；ǔＴ?span>pH 7.5以上進(jìn)行。通過(guò)SE基團(tuán)的蛋白修飾通常在pH 7.5-8.5之間進(jìn)行，而異硫氰酸基團(tuán)需在pH 9.0-10.0之間才能獲得最佳的標(biāo)記效果。

3） 反應(yīng)緩沖液

緩沖液含游離胺（比如：Tris、甘氨酸和巰基化合物）必須避免，因?yàn)檫@些也是胺反應(yīng)試劑。銨鹽（硫酸銨或醋酸銨）普遍用于蛋白沉淀中，必須在進(jìn)行染料標(biāo)記之前去除。

比如：5-FAM SE進(jìn)行蛋白標(biāo)記，可選擇50mM硼酸鈉緩沖液（pH 8.5）作為反應(yīng)緩沖液。

4） 反應(yīng)溫度

大部分標(biāo)記反應(yīng)在室溫進(jìn)行，然而，對(duì)于某些特殊的標(biāo)記反應(yīng)可能需提高或降低溫度。