HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 |
NBS0015-5ml | HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus | 5*1 mL |
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品是一款使用SYBR Green Ⅰ嵌合熒光法進(jìn)行 qPCR 反應(yīng)的專用預(yù)混液。核心組分Hot-start Taq是基于抗體法修飾,搭配針對qPCR系統(tǒng)優(yōu)化的最適 Buffer,顯著提高了擴增特異性和低拷貝基因的檢測靈敏度,能夠在寬廣的定量范圍內(nèi)得到優(yōu)異的擴增線型,對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量、檢測,重復(fù)性好,可信度高。本產(chǎn)品中含有 ROX Reference Dye,適用于大部分qPCR 儀器。本產(chǎn)品是一款2 × 預(yù)混液,只需額外加入引物、模板即可,使用方便。
圖1所示,以Hela細(xì)胞為CDNA模板,使用HS UniversalaPCR Master Mix和其他品牌的產(chǎn)品,在同等條件下擴增相同的基因。實驗結(jié)果顯示,NoninBio品牌的HS Universal gPCR Master Mix 擴增效率更高,熒光強度更強,可以獲得更高的擴增平臺值。
圖2所示,以Hela細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組cDNA為模板,使用HS UniversalqPCR Master Mix,ROX plus和其他品牌的產(chǎn)品,在同等條件下擴增相同的基因,實驗結(jié)果顯示,NoninBio品牌的HS Universal qPCRMaster Mix,ROX plus相對其他品牌,擴增效率更高,熒光強度更強,溶解曲線更集中尖銳。
實驗流程
配置如下 PCR 反應(yīng)體系
成分 | 體積 |
2 × HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus | 10 μL |
Primer F(10 μM) | 0.4 μL |
Primer R(10 μM) | 0.4 μL |
Template DNA | X μL |
ddH2O | Up to 20 μL |
表 1. HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus 反應(yīng)體系
建議 PCR 程序
溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) | |
預(yù)變性 | 95℃ | 30 sec~3 min | 1 Cycle |
循環(huán)反應(yīng) | 95℃ | 10 sec | 40 Cycles |
55-60℃ | 10~30 sec | ||
溶解曲線 | 95℃ | 15 sec | 1 Cycle |
60℃ | 60 sec | ||
95℃ | 15 sec |
表 2. HS Universal qPCR Master Mix , ROX plus反應(yīng)程序
注:95℃ 30 sec 該預(yù)變性條件適合大多數(shù)擴增反應(yīng),如模板結(jié)構(gòu)復(fù)雜,GC含量高,可將預(yù)變性時間延長至3 min,以提高預(yù)變性效果,同時酶活可以更高程度釋放,得到更好的實驗結(jié)果。
注意事項:
1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。