Golgi-Tracker Red (BODIPY? TR Ceramide), for live-cell imaging

高爾基體紅色熒光探針（活細(xì)胞成像用）

我司提供多款高爾基體（Golgi apparatus）熒光探針:

【1】NBD C6-Ceramide【綠色熒光，適用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞】

【2】BODIPY?TR Ceramide【紅色熒光，適用于活細(xì)胞】

【3】BODIPY?FL Ceramide【綠色熒光，適用于活細(xì)胞，可能某些情況下也呈現(xiàn)紅色熒光，取決于在細(xì)胞內(nèi)的定位】

產(chǎn)品簡介：

Golgi-Tracker Red是神經(jīng)酰胺的熒光偶聯(lián)物，即BODIPY? TR標(biāo)記的Ceramide（BODIPY? TR Ceramide），選擇性結(jié)合高爾基體（Golgi apparatus）Ex/Em=589/617nm，用Texas Red光學(xué)濾片設(shè)置來觀察。Golgi-Tracker Red與同類型的NBD C6-ceramide相比較，表現(xiàn)出更好的抗光衰減性和更明亮的熒光，在很多應(yīng)用上都能替代NBD C6-ceramide。Golgi-Tracker Red也能用于鞘脂運(yùn)輸和代謝研究，測定Schwann細(xì)胞合成脂類的速率，以及標(biāo)記細(xì)胞輪廓以便在共聚焦顯微鏡下觀察形態(tài)運(yùn)動。

本產(chǎn)品Golgi-TrackerRed是與BSA結(jié)合后的復(fù)合物，不僅避免有機(jī)溶劑的引入，而且對活細(xì)胞呈現(xiàn)出更高效的高爾基體標(biāo)記率。本品另提供稀釋液,使用更便捷。本品適用于活細(xì)胞的高爾基體熒光標(biāo)記，不適用于固定細(xì)胞。若需要做固定細(xì)胞的高爾基體染色，可選擇NBD C6- ceramide（貨號：NBS7694-1mg）。

Fig. Golgi-TrackerRed的激發(fā)和發(fā)射光譜圖。

保存條件: 

-20oC避光干燥保存，至少6個月有效。

產(chǎn)品組成：

產(chǎn)品使用：

1. Golgi-TrackerRed工作液的配制

① 第一次使用本品，可將Golgi-Tracker Red (0.5mM)根據(jù)單次用量分裝，比如10μl/管。本品一管含30μl（總量：1mg），由于本身量微少，務(wù)必低速離心后再開蓋，然后用低吸附槍頭吸取母液，并分裝-20℃凍存，避免反復(fù)凍融。

② 吸取少量Golgi-Tracker Red (0.5mM)按照1：100的比例用Golgi-Tracker稀釋液來稀釋，比如：取10μl Golgi-Tracker Red (0.5mM)加入到1ml Golgi-Tracker稀釋液中，混勻后即為Golgi-TrackerRed工作液，工作液請現(xiàn)配現(xiàn)用。

【注意】：Golgi-Tracker Red的工作濃度可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，推薦的稀釋比例調(diào)整范圍為1:50~1:200。

2. 活細(xì)胞高爾基體的熒光標(biāo)記

① 去除細(xì)胞培養(yǎng)液，用適量的溶液如Hanks平衡鹽溶液（含鈣鎂）或其他緩沖液來洗滌生長在蓋玻片上的細(xì)胞。

② 去除洗滌液，加入新鮮配制的Golgi-Tracker Red染色工作液，4℃孵育30min。

③ 吸走染色液，用冰浴預(yù)冷的細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞3次左右，換新鮮培養(yǎng)液37℃再孵育30min。

④ 用新鮮培養(yǎng)液再洗滌一次，隨后用熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察。此時可觀察到高爾基體呈明亮的強(qiáng)熒光染色，而細(xì)胞內(nèi)的其他膜系統(tǒng)呈比較微弱的熒光染色。

注意事項(xiàng)：

1.      整個染色過程中需注意避光。

2.      Golgi-Tracker Red在4℃，冰浴等較低溫度下會凝固而粘附在離心管官底、管壁或管蓋內(nèi)，可將置于25℃水浴溫育片刻直至全部融解后使用。對于微量液體，每次使用前低速離心使得液體全部沉降至管底，再開蓋使用。

3.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

染色示例【來自文獻(xiàn)資源】

Ref 1）

實(shí)驗(yàn)對象：擬南芥表皮細(xì)胞（Arabidopsis Epidermal Cells）

染色目的：高爾基體染色（BODIPY TR ceramide stain for Golgi apparatus）

染色結(jié)果：

Fig 1. Subcellular Location of RGXT1-EGFP Fusion Protein in Arabidopsis Epidermal Cells after Biolistic Particle Delivery Analyzed by CLSM. (F) Fluorescence from the RGXT1-EGFP fusion protein. (G) Fluorescence from the BODIPY TR ceramide. (H) Merged images of (F) and (G) showing that the RGXT1-EGFP fusion protein colocalizes with the BODIPY TR ceramide.

Ref 2）

實(shí)驗(yàn)對象：外泌體（Exosomes）

染色目的：外泌體染色（Exosome staining）

染色步驟：總的來說，1?μl TR Ceramide儲存液 (dissolved in DMSO, 1?mM) or 20?μl anti-CD63加入 3?×?108外泌體（200?μl），37℃孵育20min。通過外泌體純化柱（Exosome Spin Columns）來去除未標(biāo)記的染料或抗體，轉(zhuǎn)到載玻片（108in 200?μl），干燥過夜，共聚焦成像分析。

Fig 2. Isolation and identification of plasma exosomes in rhesus macaques. PBMC (A) and exosomes (B) stained by BODIPY TR, or exosomes stained by CD63 (C). Exosomes were isolated from plasma, stained by BODIPY TR, and spun onto the slide. Note CD63 aggregation on the membrane of small exosome vesicles in heterogeneous size.

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