Hoechst 33342 細(xì)胞核探針

溫馨提示：見(jiàn)我司整理的細(xì)胞核（Cell Nuclear）熒光探針產(chǎn)品專(zhuān)題。

產(chǎn)品描述

Hoechst 33342，也稱為Bisbenzimide H 33342（雙苯酰亞胺H 33342），是一種A:T特異性的DNA小溝配基，具有細(xì)胞膜滲透性，廣泛用于細(xì)胞核DNA檢測(cè)的熒光染料。與DNA結(jié)合后產(chǎn)生非常強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光，最大激發(fā)波長(zhǎng)在350nm左右，最大發(fā)射波長(zhǎng)在461nm左右。與其它Hoechst染料不同，Hoechst 33342由于多一個(gè)乙基，具有更強(qiáng)的親脂性。研究發(fā)現(xiàn)可替代幾種著名的DNA嵌入劑。

Hoechst 33342可通過(guò)流式細(xì)胞分選（FACS）進(jìn)行基于DNA內(nèi)容物的活細(xì)胞分選，可用來(lái)監(jiān)測(cè)活細(xì)胞的染色質(zhì)分布，用來(lái)檢測(cè)BrdU插入細(xì)胞情況，通過(guò)熒光顯微鏡進(jìn)行固定細(xì)胞觀察，和研究凋亡早期和細(xì)胞周期分布情況。除了在熒光方面的功能，Hoechst 33342在細(xì)胞類(lèi)型區(qū)分方面呈現(xiàn)多樣化效應(yīng)?？捎脕?lái)誘導(dǎo)細(xì)胞分化，可逆結(jié)合弗蘭德紅白血病細(xì)胞，抑制Topo I（拓?fù)洚悩?gòu)酶I）活性，誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞的凋亡，以及調(diào)控連接肌質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞的Ca2+外流并影響細(xì)胞分化。

本品以溶液形式提供，用于細(xì)胞核染色，推薦工作濃度為0.5-10μg/ml。

產(chǎn)品特性:

1） CAS NO：23491-52-3

2） 英文同義名：2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride; bisBenzimide H 33342 trihydrochloride; HOE 33342; Hoechst 33342 bisBenzimide;

3） 中文同義名：2'-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑三鹽酸鹽；雙苯酰亞胺H 33342三鹽酸鹽；Hoechst 33342雙苯酰亞胺；

4） 分子式：C27H28N6O · 3HCl · xH2O

5） 分子量：561.93 (anhydrous basis)

6） 純度：≥95%

7） 外觀：黃綠色粉末

8） Ex/Em：346/460 nm；350/461 nm（Hoechst 33342-DNA）；

保存與運(yùn)輸方法

保存：-20°C避光保存，1年有效。 

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

使用方法

1. 工作液配制

使用前用生理鹽水或PBS稀釋適量Hoechst 33342，配制成所需要的工作濃度（0.5-10μg/ml）。

2. 固定的細(xì)胞或組織染色

對(duì)于固定的細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。Hoechst 33342染色通常在其他染色的最后進(jìn)行。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行Hoechst 33342染色。

2.1對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片：加入適量Hoechst 33342染色液，覆蓋住樣品即可。

對(duì)于懸浮細(xì)胞：至少加入待測(cè)染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5min。

2.2吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5min。

2.3直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。Ex/Em=350/461nm。

3. 活的細(xì)胞或組織染色

3.1細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33342染色液，約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。對(duì)于六孔板，一個(gè)孔通常需加入1ml染色液；對(duì)于96孔板，一個(gè)孔通常需加入100μl染色液。

3.2在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10～20min。

3.3用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。

3.4直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。Ex/Em=350/461nm。

注意事項(xiàng)

1） Hoechst 33342對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

2） 熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。

3） 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。