NBS5931 Coelenterazine v 腔腸素v
貨號(hào)：NBS5931-500ug；
NBS5931-1mg
品牌：NoninBio
Coelenterazine v 腔腸素v
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 | 價(jià)格 |
NBS5931-500ug | Coelenterazine v 腔腸素v | 500ug | 1735 |
NBS5931-1mg | Coelenterazine v 腔腸素v | 2x500ug | 2973 |
【溫馨提示】：見我司提供的活體成像底物-腔腸素及衍生物產(chǎn)品專題。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
腔腸素（Coelenterazine）是在水生生物中發(fā)現(xiàn)的一種發(fā)光基團(tuán)（luminophore），是許多熒光素酶的作用底物，包括海腎熒光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜錨定熒光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和藪枝蟲熒光素酶（Obelia luciferase），和發(fā)光蛋白包括水母發(fā)光蛋白（Aequorin）的構(gòu)成之一。其作用原理是以腔腸素為底物的熒光素酶，在含分子氧的條件下，氧化腔腸素產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物，在此過(guò)程發(fā)射藍(lán)色光，光波長(zhǎng)在450~480nm。而甲蟲（或螢火蟲）熒光素/熒光素酶（FLuc）系統(tǒng)不同，其在含分子氧的條件下，還需要ATP和Mg2+的存在才能同時(shí)發(fā)光，光波長(zhǎng)在550-570nm。正由于生物發(fā)光信號(hào)和底物的差異，RLuc常常與FLuc聯(lián)合用于多重轉(zhuǎn)錄報(bào)告基因研究，或用作Fluc系統(tǒng)內(nèi)螢火蟲熒光素酶轉(zhuǎn)染的內(nèi)參。
腔腸素應(yīng)用甚是廣泛，包括：1）活細(xì)胞或組織的鈣離子檢測(cè)；2）細(xì)胞或組織的超氧化物和過(guò)氧亞硝基陰離子（活性氧，ROS）化學(xué)發(fā)光檢測(cè)；3）基因報(bào)告基因檢測(cè)；4）動(dòng)物活體檢測(cè)；5）ELISA和生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）藥物高通量篩選（HTS）。
天然腔腸素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最豐富的一種腔腸素，也是目前應(yīng)用最普遍的一種標(biāo)準(zhǔn)底物。不僅是脫輔基水母發(fā)光蛋白（APO）的底物，也是海腎熒光素酶（Rluc）和分泌型膜錨定熒光素酶（Gluc）等熒光素酶的作用底物。前者用于檢測(cè)鈣離子濃度，后者用作熒光素酶的報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)。還可用于生物共振能量轉(zhuǎn)移BRET，細(xì)胞或組織內(nèi)的超氧陰離子和過(guò)氧化亞硝基陰離子水平（ROS）的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)等。
腔腸素v（Coelenterazine v，CTZ-v）是天然腔腸素（CTZ-Native）的一種合成衍生物，多帶一個(gè)芐基環(huán)。CTZ-v具有一獨(dú)特的特性，能夠?qū)⒁吧秃ＤI熒光素酶（wt RLuc），RLuc8和綠色海腎熒光素酶（Green RLuc）的發(fā)射光譜遷移到更長(zhǎng)波長(zhǎng)。
產(chǎn)品特性：
1）化學(xué)名：16-benzyl-5-hydroxy-13-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-11,14,17-triazatetracyclo [8.7.0.0^{2,7}.0^{11,15}]heptadeca-1(10),2(7),3,5,8,13,15-heptaen-12-one
2）同義名：CTZ-v; v-Coelenterazine; CLZN-v; v-腔腸素；
3）分子式：C28H21N3O3
4）分子量：447.48 g/mol
5）純度：≥93%
6）外觀：淺黃色粉末
7）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：
保存條件:
-20℃干燥避光保存，且保存于惰性氣體內(nèi)。至少一年有效。
產(chǎn)品組成：
組分 | 名稱 | 規(guī)格 | |
NBS5931-500ug | NBS5931-1mg | ||
NBS5931-A | Coelenterazine v (powder) | 1×500μg | 2×500μg |
NBS5931-B | Specialized Solvent for Coelenterazine v | 2×500μl | 4×500μl |
產(chǎn)品使用：
【注意】：最好在熒光計(jì)分析或?qū)嶒?yàn)前馬上配制新鮮的腔腸素溶液。
1. 將低溫保存的凍干粉置于-20℃回至室溫，低溫保存的溶劑用微量恒溫儀（heat block）回至室溫，之后進(jìn)行短暫低速離心，使得管內(nèi)組分都落到底部。
2. 往500μg腔腸素v內(nèi)加入1ml 專用的腔腸素溶劑，可用微量恒溫儀加熱到70℃促進(jìn)粉末完全溶解，混勻后即得到0.5mg/ml 儲(chǔ)存液?！咀⒁猓翰灰盟″伡訜?，因溶液吸潮后會(huì)引起腔腸素v的快速降解】
3. 用PBS或TBS稀釋儲(chǔ)存液到所需的水溶性工作液（比如，若熒光計(jì)測(cè)定所需的濃度為50μM，加447.5μl（0.5mg/ml）到10ml PBS）。【注意：工作液現(xiàn)配現(xiàn)用，不可保存】
4. 腔腸素v儲(chǔ)存液置于-80℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有條件的話保存在氮?dú)饣驓鍤鈨?nèi)。盡快用完。當(dāng)儲(chǔ)存液顏色變?yōu)樯钭厣?span>/黑色，請(qǐng)勿繼續(xù)使用，這表明藥物完全降解（氧化）。
附錄1 天然腔腸素及其衍生物的光譜特性：
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | Em (nm) | RLC[1] | Relative Intensity[2] | Half-rise time (ms) [3] |
466 | 1.00 | 1 | 6-30 | ||
466 | 0.75 | 16 | 6-30 | ||
400 | / | / | / | ||
405&465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 | ||
472 | 0.80 | 20 | 6-30 | ||
442 | 0.63 | 28 | 2-5 | ||
445 | 0.65 | 500 | 2-5 | ||
468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 | ||
[1] RLC = relative luminescence capacity: Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+relative to native aequorin = 1.0. [2] Ratio of the luminescence of aequorin reconstituted with coelenterazine analog relative to native aequorin at 100 nM Ca2+. [3] Half-Rise Time: The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1 mM Ca2+to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest. | |||||
附錄2天然腔腸素及其衍生物的應(yīng)用差異：
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 應(yīng)用特征 |
應(yīng)用非常廣泛的標(biāo)準(zhǔn)底物。腔腸素是天然水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的發(fā)光基團(tuán)，也是海腎熒光素酶（Rluc）的底物。底物的快速再生（fast regeneration）比較重要的實(shí)驗(yàn)推薦使用天然腔腸素。 1）生物發(fā)光檢測(cè)鈣離子的靈敏度非常高，檢測(cè)范圍從0.1μM到＞100μM；2）使用腔腸素監(jiān)測(cè)報(bào)告基因表達(dá)是其主要應(yīng)用；3）其他應(yīng)用包括生物共振能量轉(zhuǎn)移BRET，化學(xué)發(fā)光檢測(cè)細(xì)胞或組織內(nèi)的超氧陰離子和過(guò)氧化亞硝基陰離子水平（ROS）； | ||
1）腔腸素h形成的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物比天然腔腸素復(fù)合物的光強(qiáng)度高10倍以上；2）比天然腔腸素對(duì)鈣離子敏感度更高；3）也適用報(bào)告基因分析。 | ||
也稱為DeepBlue C，是一種腔腸素衍生物，用作海腎熒光素酶Rluc的底物，發(fā)射峰約400nm。含GFP受體的BRET研究是Rluc的首選底物，因其對(duì)GFP受體的發(fā)射波干擾非常小。不可用作Gluc底物。 | ||
體外水母發(fā)光蛋白再生中腔腸素e的速度最高，具有雙發(fā)射峰，分別為405nm和465nm，使其能在pCa 5-7范圍內(nèi)通過(guò)雙發(fā)射峰熒光強(qiáng)度比率的方式測(cè)定Ca2+濃度，提高檢測(cè)準(zhǔn)確度。但由于滲透性差，不適合胞內(nèi)應(yīng)用。在溶液中穩(wěn)定性差。 | ||
腔腸素f形成的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的光強(qiáng)度是天然腔腸素復(fù)合物的20倍，最大發(fā)射波長(zhǎng)約長(zhǎng)8nm。具有最好的細(xì)胞滲透性。當(dāng)需要具極高鈣離子Ca2+靈敏度的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物，建議用腔腸素f。 | ||
Coelenterazine cp產(chǎn)生水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的光強(qiáng)度是天然腔腸素復(fù)合物的15倍，且具有更快的Ca2+反應(yīng)性。 | ||
其生物發(fā)光強(qiáng)度最高（腔腸素hcp形成水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強(qiáng)度比天然腔腸素復(fù)合物高190倍），對(duì)Ca2+反應(yīng)速度快。 | ||
腔腸素fcp形成的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的光強(qiáng)度是天然腔腸素復(fù)合物的135倍。 | ||
所有的腔腸素衍生物中熒光強(qiáng)度最弱，對(duì)Ca2+反應(yīng)時(shí)間明顯慢于天然腔腸素。一種非常有用的低靈敏腔腸素。 | ||
體外腔腸素i水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強(qiáng)度僅為天然腔腸素復(fù)合物的3%，在所有腔腸素衍生物種對(duì)鈣離子的反應(yīng)時(shí)間最慢。 | ||
體外腔腸素ip水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強(qiáng)度幾乎比天然腔腸素復(fù)合物高50倍，但對(duì)鈣離子的反應(yīng)時(shí)間比天然腔腸素慢。 | ||
非常優(yōu)越的抗氧化劑，靶向細(xì)胞內(nèi)來(lái)源于單態(tài)氧和超氧化物陰離子產(chǎn)生的活性氧物質(zhì)（ROS）。 |
注意事項(xiàng)：
1. 腔腸素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全凍干粉的狀態(tài)保存在惰性氣體內(nèi)，密封后置于-20℃或-70℃長(zhǎng)期避光保存。管內(nèi)即使有微量空氣，也會(huì)隨著時(shí)間慢慢氧化腔腸素使其活性喪失，這樣不同實(shí)驗(yàn)之間的定量結(jié)果可能很不可信。
2. 商業(yè)化腔腸素的種類繁多，有天然腔腸素，以及各種腔腸素衍生物（比如，腔腸素h，腔腸素400a，腔腸素e，腔腸素f，腔腸素hcp）。它們對(duì)鈣離子的親和力，光譜特性，以及應(yīng)用傾向上會(huì)有差異，詳見附錄2—天然腔腸素及其衍生物的光譜特性，附錄3—天然腔腸素及其衍生物的應(yīng)用差異選擇適當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品。
3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
公司名稱：上海諾寧生物科技有限公司
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