Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM)硫化氫熒光探針

【溫馨提示】：見我司整理的硫化氫（H2S）熒光探針產(chǎn)品專題—WSP-1/WSP-5/AzMC。 

產(chǎn)品簡介：

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM)是一種用于硫化氫（H₂S）檢測的細(xì)胞可捕獲的熒光探針。一旦進(jìn)入胞內(nèi)，乙酰甲酯基團(tuán)被胞內(nèi)酯酶水解生成一陰電荷，從而探針被捕獲停留在胞內(nèi)。探針中的疊氮化物官能團(tuán)與緩沖液或細(xì)胞中的H2S反應(yīng)生成酰胺羅丹明110，最大激發(fā)和發(fā)射波長分別是498/526nm 。SF7-AM能用于監(jiān)測人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECS）中VEGF誘導(dǎo)產(chǎn)生的H₂S。 

產(chǎn)品特性：

1） CAS NO：1416872-50-8

2） 化學(xué)名：N-[2-[(Acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-N-[(3',6'-diazido-3

-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'- [9H]xanthen]-5-yl)carbonyl]glycine (acetyloxy)methyl ester

3） 同義名：Sulfidefluor-7 acetoxymethyl ester; SF7 AM;

4） 分子式：C₃₁H₂₃N₇O₁₂

5） 分子量：685.6

6） 外觀：白色固體

7） 純度：≥95%

8） Ex/Em：498/526nm

9） 溶解性：溶于DMSO（5mg/ml）、DMF（10mg/ml）

保存條件: 

-20oC避光干燥保存，至少2年有效。 

產(chǎn)品使用：

1、 儲(chǔ)存液制備

將低溫保存的產(chǎn)品從冰箱取出，置于室溫回溫至少20min。低速離心3-5min。之后往瓶內(nèi)加入適量無水DMSO充分溶解配成適宜濃度的儲(chǔ)存液（比如，1mg SF7-AM（Mw: 685.6）加入291μl DMSO充分溶解后即得到5mM儲(chǔ)存液）。按照單次用量分裝，≤-20℃避光凍存，避免反復(fù)凍融，建議1個(gè)月使用。

2、 工作濃度

正式實(shí)驗(yàn)前，取上述配制的儲(chǔ)存液用適當(dāng)緩沖液或培養(yǎng)基稀釋到所需工作濃度即可。具體的工作濃度請(qǐng)參考文獻(xiàn)或根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)需求來進(jìn)行優(yōu)化調(diào)整。參考下方一些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，來自公開文獻(xiàn)，僅作參考。

應(yīng)用示例1：使用SF7-AM來測定VEGF刺激HUVECs產(chǎn)生的內(nèi)源性H₂S。HUVECs加入2.5μM SF7-AM于37℃，5% CO₂孵育30min。之后更換不含探針的培養(yǎng)基，細(xì)胞成像。對(duì)于VEGF刺激，取2μl VEGF（10μg/ml）加入孔內(nèi)使其終濃度為40ng/ml。細(xì)胞再于37℃，5% CO₂孵育30min。相同的區(qū)域再進(jìn)行細(xì)胞成像。共聚焦成像用488nm氬離子激發(fā)器激發(fā)，用META檢測器收集500-650nm之間的發(fā)射熒光信號(hào)?！疚墨I(xiàn)來源：Chao, C., Zatarain, J.R., Ding, Y. et al. Cystathionine-β-Synthase Inhibition for Colon Cancer: Enhancement of the Efficacy of Aminooxyacetic Acid via the Prodrug Approach. Mol Med 22, 361–379 (2016). 】

應(yīng)用示例2：使用SF7-AM來測定OA-CysTCM-1的H2S釋放能力。bEnd.3細(xì)胞鋪在多聚D-賴氨酸包被的培養(yǎng)板上。長滿的細(xì)胞用PBS清洗后，用SF7-AM（5 μM）孵育30min。之后用PBS清洗，孵育在含OA-CysTCM-1 (100 μM)和半胱氨酸（250 μM）或只含半胱氨酸（250 μM）的溶液30min。成像前，細(xì)胞用PBS清洗后，加入2ml PBS。用帶標(biāo)準(zhǔn)GFP濾片的熒光顯微鏡成像?！疚墨I(xiàn)來源：Zhao Y, Steiger AK, Pluth MD. Cysteine-activated hydrogen sulfide (H₂S) delivery through caged carbonyl sulfide (COS) donor motifs. Chemical Communications (Cambridge, England). 2018 May;54(39):4951-4954. DOI: 10.1039/c8cc02428f. PMID: 29701221; PMCID: PMC5965689.】

 Figure. H2S Release from OA-CysTCM-1 in bEnd.3 cells.Top: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM) and SF7-AM (5 μM). Bottom: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM), OA-CysTCM-1 (100 μM), and SF7-AM (5 μM). Scale bar represents 100 μM.

注意事項(xiàng)：

1.      整個(gè)染色過程中需注意避光。

2.      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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