DiOC2(3) 綠色膜電位熒光探針

產(chǎn)品簡介：

DiOC2(3)，英文全名3,3'-Diethyloxacarbocyanine Iodide，CAS NO. 905-96-4，是一種膜電位探針，可通過流式細(xì)胞儀檢測根據(jù)發(fā)射波長熒光信號比來分析細(xì)菌活力。DiOC2(3)常用來測定細(xì)菌膜電位，也能用于研究某些活細(xì)胞比如大鼠胚胎成纖維細(xì)胞、猴腎細(xì)胞、中國倉鼠肺成纖維細(xì)胞和小鼠3T3成纖維細(xì)胞。

DiOC2(3)用來檢測細(xì)菌膜電位的工作原理在于：DiOC2(3)在所有細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)發(fā)綠色熒光，由于更高的膜電位引起染料分子發(fā)生自聚作用，使得染料的熒光往紅色發(fā)射波長處遷移，紅色熒光強(qiáng)度增高，此時紅色/綠色熒光信號比高。質(zhì)子離子載體比如CCCP，通過去除質(zhì)子梯度來破壞線粒體膜電位，從而導(dǎo)致紅色熒光強(qiáng)度降低，此時紅色/綠色熒光信號比降低。DiOC2(3)的最大激發(fā)和發(fā)射波長約482nm和497nm。經(jīng)DiOC2(3)標(biāo)記的細(xì)胞用流式細(xì)胞儀分析（用488nm激發(fā)，分別用適合FITC（綠色）和Texas Red（紅色）的發(fā)射濾片來檢測）。

產(chǎn)品特性：

1）  CAS NO.：905-96-4

2）  化學(xué)名：3-ethyl-2-[3-(3-ethyl-2(3H)-benzoxazolylidene)-1-propenyl]-benzoxazolium iodide

3）  同義名：3,3'-Diethyloxacarbocyanine Iodide 3,3′-二乙基氧雜羰花青碘; DiOC2(3) Iodide; DOC Iodide;

4）  分子式：C21H21IN2O2

5）  分子量：460.31

6）  純度：>95.0% (HPLC)

7）  Ex/Em：482/497nm（in methanol）

8）  外觀：紅色粉末或結(jié)晶

9）  溶解性：溶于DMSO，DMF，無水乙醇，微溶于水

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，至少一年有效。

產(chǎn)品使用：

1. 染色液制備

1） 儲存液制備：用 DMSO或無水乙醇配置濃度1～5 mM的儲存液。例如，取10mg DiOC2(3)（MW：460.31 g/mol）溶于4.35ml 無水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的儲存液。【注意】未使用的儲存液分裝儲存在-20℃，避免反復(fù)凍融，且要避光保存。

2） 工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，調(diào)整到合適的工作濃度。【注意】：工作液最終濃度需要根據(jù)不同細(xì)胞系和實驗體系來優(yōu)化。

2. 染色方法

對于細(xì)菌染色，最好取對數(shù)生長期的健康細(xì)菌，用無菌PBS或其他適當(dāng)平衡鹽緩沖液稀釋到~1 x 10⁶cells/ml。也可直接從細(xì)菌培養(yǎng)液中取適量的細(xì)菌不經(jīng)清洗進(jìn)行稀釋。細(xì)菌染色用DiOC2(3)的工作濃度可為30μM，室溫染色15~30min。

注意事項：

1.      熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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