DiOC2(3) 綠色膜電位熒光探針

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產(chǎn)品簡介：

DiOC2(3)，英文全名3,3'-Diethyloxacarbocyanine Iodide，CAS NO. 905-96-4，是一種膜電位探針，可通過流式細胞儀檢測根據(jù)發(fā)射波長熒光信號比來分析細菌活力。DiOC2(3)常用來測定細菌膜電位，也能用于研究某些活細胞比如大鼠胚胎成纖維細胞、猴腎細胞、中國倉鼠肺成纖維細胞和小鼠3T3成纖維細胞。

DiOC2(3)用來檢測細菌膜電位的工作原理在于：DiOC2(3)在所有細菌細胞內(nèi)發(fā)綠色熒光，由于更高的膜電位引起染料分子發(fā)生自聚作用，使得染料的熒光往紅色發(fā)射波長處遷移，紅色熒光強度增高，此時紅色/綠色熒光信號比高。質子離子載體比如CCCP，通過去除質子梯度來破壞線粒體膜電位，從而導致紅色熒光強度降低，此時紅色/綠色熒光信號比降低。DiOC2(3)的最大激發(fā)和發(fā)射波長約482nm和497nm。經(jīng)DiOC2(3)標記的細胞用流式細胞儀分析（用488nm激發(fā)，分別用適合FITC（綠色）和Texas Red（紅色）的發(fā)射濾片來檢測）。

產(chǎn)品特性：

1）  CAS NO.：905-96-4

2）  化學名：3-ethyl-2-[3-(3-ethyl-2(3H)-benzoxazolylidene)-1-propenyl]-benzoxazolium iodide

3）  同義名：3,3'-Diethyloxacarbocyanine Iodide 3,3′-二乙基氧雜羰花青碘; DiOC2(3) Iodide; DOC Iodide;

4）  分子式：C21H21IN2O2

5）  分子量：460.31

6）  純度：>95.0% (HPLC)

7）  Ex/Em：482/497nm（in methanol）

8）  外觀：紅色粉末或結晶

9）  溶解性：溶于DMSO，DMF，無水乙醇，微溶于水

10）化學結構圖：

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，至少一年有效。

產(chǎn)品使用：

1. 染色液制備

1） 儲存液制備：用 DMSO或無水乙醇配置濃度1～5 mM的儲存液。例如，取10mg DiOC2(3)（MW：460.31 g/mol）溶于4.35ml 無水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的儲存液?！咀⒁狻课词褂玫膬Υ嬉悍盅b儲存在-20℃，避免反復凍融，且要避光保存。

2） 工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，調(diào)整到合適的工作濃度?！咀⒁狻浚汗ぷ饕鹤罱K濃度需要根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。

2. 染色方法

對于細菌染色，最好取對數(shù)生長期的健康細菌，用無菌PBS或其他適當平衡鹽緩沖液稀釋到~1 x 10⁶cells/ml。也可直接從細菌培養(yǎng)液中取適量的細菌不經(jīng)清洗進行稀釋。細菌染色用DiOC2(3)的工作濃度可為30μM，室溫染色15~30min。

注意事項：

1.      熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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